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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間:2018-03-15 作者:佚名 來源:網(wǎng)絡(luò)整理
在發(fā)病的4例狐貍中多為幼狐,發(fā)病日齡為60~100日齡。老齡狐發(fā)病很少,極低日齡幼狐發(fā)病率很低?祻(fù)狐貍可獲得終生免疫。本次發(fā)病的狐貍養(yǎng)殖場同時(shí)養(yǎng)著水貂,但在相同的免疫情況下,水貂卻沒有發(fā)病。這4家發(fā)病的養(yǎng)殖戶中,有兩戶沒有免疫犬瘟熱疫苗,出現(xiàn)發(fā)病,死亡率較高,各死亡30多只;另外兩家中,其中一家60日齡時(shí)免疫犬瘟熱?
1腦炎
病毒性腸炎三聯(lián)苗,結(jié)果在80日齡時(shí)發(fā)病,共死亡2只,另一家沒有提前免疫犬瘟熱疫苗,而只在98日齡時(shí)免疫犬瘟熱和腦炎二聯(lián)苗,免疫2天后就發(fā)生了本病,發(fā)病后注射了一種治療犬瘟熱的藥物,結(jié)果共死亡10只。免疫日齡早并且免疫次數(shù)多的狐貍發(fā)病率和死亡率低,甚至可能不發(fā)病。本病持續(xù)時(shí)間為2~3天,個(gè)別有的長為15~20天。
該病多見于秋冬季。在大型綜合經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)場里,犬瘟熱通常首先在犬科動(dòng)物如狐貍?cè)褐辛餍,免疫和預(yù)防及消毒控制好的話可能不會(huì)傳播給水貂等,但若控制不好則會(huì)傳播給水貂等鼬科動(dòng)物。本次發(fā)病的4家養(yǎng)殖場中都只在狐群中發(fā)病,而在水貂群中則沒有發(fā)病。
2臨床癥狀發(fā)病的狐貍有藍(lán)狐和銀狐,自然感染的潛伏期通常為3~6天或更長。病狐最初表現(xiàn)精神不振,倦怠,食欲減退,從鼻和眼流出水樣分泌物,后期眼睛有固狀眼屎,鼻腔流出膿性鼻涕,病狐咳嗽,喘氣困難,拉稀薄糞便或暗紅色稀便,嘔吐,有時(shí)嘔出血液來,體溫升高至39~41℃,持續(xù)1~3天,降至接近常溫,幾天后又第2次升溫,持續(xù)7天以上,呈雙相熱型。個(gè)別病例在下腹部、大腿內(nèi)側(cè)和外耳道發(fā)生水皰性膿性皮疹,爪掌變硬。有些病例的上述癥狀明顯,有的病例表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀,病狐高度沉郁,站立困難,共濟(jì)失調(diào),或作圓圈運(yùn)動(dòng)。全身呈強(qiáng)直性痙攣或顛癇性驚厥和昏迷。病狐多取死亡轉(zhuǎn)歸。耐過的病例常有后遺癥,如麻痹癥。最急性型病狐常表現(xiàn)出突然高熱,不見明顯的臨床癥狀,在1~2天內(nèi)死亡。從本次發(fā)病的4個(gè)病例中都沒有分離到細(xì)菌,因?yàn)闆]有并發(fā)細(xì)菌感染,所以死亡率不太高,沒有免疫的狐群死亡率較高,最高達(dá)到15%。
3病理變化由于本病毒為廣泛嗜性病毒,對上皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞有特殊的親和力。所以病毒分布廣泛。典型病例的外觀可見化膿性皮炎,皮屑大量脫落,鼻、唇、眼、肛門皮膚增厚,爪掌內(nèi)部腫大堅(jiān)硬。眼、鼻黏膜呈漿液性、黏液性及化膿性炎癥。剖檢時(shí),可見氣管內(nèi)黏液性或化膿性泡沫狀分泌物。肺呈小葉性或大葉性肺炎,出現(xiàn)肺肉變。胃黏膜出血,胃內(nèi)有黏液,有時(shí)胃黏膜脫落。腦有非化膿性腦膜炎。在十二指腸和空腸及直腸黏膜出血,腸內(nèi)有黏液,泄殖腔黏膜出血,心外膜、腎包膜及膀胱黏膜有出血點(diǎn)或出血斑。脾腫大出血。肝臟腫大,肝上有出血點(diǎn)或有白色壞死點(diǎn),腎脂肪變性,呈局灶性壞死。
4診斷根據(jù)流行情況、臨床癥狀及剖檢變化可懷疑本病。最后確診有賴于實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)結(jié)果。我們進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室的包涵體檢查、動(dòng)物接種試驗(yàn)、病毒分離、電鏡觀察等實(shí)驗(yàn)。
4.1細(xì)菌檢查對4例病例無菌取病死狐貍的肝、脾、腎接種營養(yǎng)瓊脂和麥康凱瓊脂,在37.5℃溫箱中培養(yǎng)24~48h。4例皆無細(xì)菌生長。
4.2包涵體檢查刮取病死狐的膀胱、腎盂、膽囊等組織黏膜,放于載玻片上,滴加1~2滴生理鹽水,研磨均勻攤成標(biāo)本片。干燥后用甲醇固定3min自然干燥后,用蘇木素染色液加溫染色20min,水洗,再用0.1%伊紅水溶液染色5min。干燥后鏡檢,細(xì)胞核為藍(lán)紫色,細(xì)胞漿為玫瑰色,包涵體呈紅色,為圓形或橢圓形,具有清晰的邊界和均質(zhì)的邊緣。在一個(gè)細(xì)胞內(nèi)可見3~5個(gè)包涵體,在細(xì)胞漿內(nèi)較多,細(xì)胞核內(nèi)較少。
4.3病毒分離用SPF雞胚絨毛尿囊膜接種進(jìn)行病毒分離,在實(shí)驗(yàn)室取死亡狐的病料,腦、肝、脾制成1∶4的懸液,經(jīng)無菌處理后接種8日齡SPF雞胚絨毛尿囊膜,每胚接種0.1~0.2ml,接種10枚雞胚,另取3枚雞胚不接種病料做對照,在孵化器內(nèi)孵化或在37.8℃溫箱內(nèi)培養(yǎng),3天后觀察5枚雞胚的變化,見雞胚出血,發(fā)育變小,尿囊膜水腫,在尿囊膜上有灰白色不透明物,7天后再觀察5枚雞胚的變化,雞胚萎縮,皮膚出血,尿囊膜上形成菌落樣物增厚似痘斑狀,水腫。將絨毛尿囊膜用10%福爾馬林保存,做病理切片觀察病毒的形態(tài)。另將絨毛尿囊膜用研磨器研磨制成勻漿,用高速離心機(jī)高速離心后取沉淀物直接觀察病毒的形態(tài)。
4.4動(dòng)物接種試驗(yàn)和病毒再分離取典型病例的腦、肝、胸腺、脾臟和淋巴結(jié)等病料,采用離心或抽濾及抗生素等方法進(jìn)行無菌處理,再用生理鹽水制成10%混懸劑。在80~100日齡的雪貂腦內(nèi)接種0.5~1ml,8~12天后,出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀,發(fā)病5~6天后死亡。取死亡雪貂的腦、肝、脾制成1∶4的懸液,按上法進(jìn)行雞胚接種和電鏡觀察,出現(xiàn)相同的雞胚和痘斑變化及觀察到相同形態(tài)的病毒。說明雪貂中分離的病毒與狐貍自然發(fā)病分離的病毒是完全相同的。
4.5電鏡觀察將絨毛尿囊膜做超薄切片和尿囊膜處理物進(jìn)行病毒觀察,都發(fā)現(xiàn)有犬瘟熱病毒;在超薄切片中見病毒為球形、橢圓形、梨形、長桿棒狀形、黃瓜形等,大小為100~600nm,病毒具有雙層囊膜,囊膜表面上有長1.3~2nm的纖突,病毒顆粒內(nèi)部有“峭樣結(jié)構(gòu)”。在尿囊膜處理物中表現(xiàn)為不規(guī)則形,直徑大小為200nm,纖突不明顯。
4.6間接免疫熒光抗體法檢查犬瘟熱病毒從2例?死亡狐貍的臟器(肝、脾、肺、膀胱等)中采集病料并做成冰凍組織切片,用間接免疫熒光法檢查組織細(xì)胞中是否有病毒存在。根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn),病毒陽性組織中呈現(xiàn)蘋果綠色熒光,陰性呈現(xiàn)土黃色熒光。從2例發(fā)病狐貍制作的冷凍組織切片,經(jīng)熒光抗體檢測都出現(xiàn)蘋果綠色熒光,表明在發(fā)病組織中都存在犬瘟熱病毒。
5防治
5.1治療發(fā)現(xiàn)病狐應(yīng)及時(shí)隔離,確診,采取有效治療措施。對于病狐用高免血清緊急治療。皮下或肌肉注射2~3ml/kg體重,最好每天1次,連用3次,務(wù)必選用質(zhì)量好的高免血清,否則治療不佳。用藥物對癥治療,如使用退熱、止痛、鎮(zhèn)痙、消炎等藥物,可減少死亡率。也可使用抗病毒藥物如病毒唑,抗生素如氯霉素、青霉素、慶大霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素、先鋒霉素系列藥物等預(yù)防并發(fā)或繼發(fā)細(xì)菌感染,減少死亡率。對于未發(fā)病的狐貍,應(yīng)用疫苗進(jìn)行緊急預(yù)防注射。
5.2免疫和預(yù)防狐貍應(yīng)在春秋兩季進(jìn)行常規(guī)的預(yù)防注射,可防止本病發(fā)生。國內(nèi)已研制出單苗、三聯(lián)苗或多聯(lián)苗,在實(shí)踐中取得很好的免疫效果。幼狐6、8、14周齡時(shí)分別皮下注射3ml,至少應(yīng)于6周齡時(shí)和14周齡時(shí)各免疫1次。成年狐在4個(gè)月時(shí)免疫1次,間隔14天再注射1次,種狐在配種前15天內(nèi)再加強(qiáng)免疫1次。免疫期為6個(gè)月。
5.3綜合處理對于養(yǎng)狐場對狐貍籠,應(yīng)經(jīng)常清掃糞便,對狐籠和水食槽等用具定期用消毒藥消毒。嚴(yán)禁狐貍場中人員流動(dòng),尤其場外人員嚴(yán)格限制進(jìn)入狐貍場。對于車輛和人員進(jìn)入狐貍場時(shí)應(yīng)注意消毒。防止野鼠進(jìn)入狐貍場,消滅養(yǎng)狐場中的家鼠和昆蟲等。
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