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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間：2018-03-15 作者：佚名 來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)整理
蜜蜂人工授精技術(shù)在1927年取得成功，中國(guó)開(kāi)展該項(xiàng)技術(shù)的研究始于1959年，20世紀(jì)80年代后，已達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平，利用該技術(shù)取得了單雄授精、單雄多雌授精和自體授精的新突破。作者用聚乙烯授精針頭，使人工授精操作更加直觀、高效和安全，并且把在實(shí)驗(yàn)室操作的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了轉(zhuǎn)地蜂場(chǎng)在野外進(jìn)行授精的重大突破，選育出喀（阡）黑環(huán)系、白山五號(hào)、松丹?、?號(hào)和蜜漿雙高產(chǎn)的黃環(huán)系等優(yōu)質(zhì)蜂王品種（系）。當(dāng)前，蜜蜂的人工授精技術(shù)，在原種保純、雜交制種乃至工程育種中起到了不可替代的作用。
一、設(shè)備和生理液
1、儀器設(shè)備 人工授精儀組合、生物實(shí)體顯微鏡、二氧化碳鋼瓶、膠管、洗氣瓶、測(cè)微尺、血細(xì)胞記數(shù)板、雄蜂飛翔籠以及常規(guī)生化實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備。
2、生理液制備 生理液主要用于稀釋、保護(hù)精液和沖洗器具。生理液有效成分的濃度、溶液的ph等均可影響精子的活力和授精效果。因此，生理液的配制要求十分嚴(yán)格。目前，較為常用的生理液主要有：
（1）基輔生理液（paufler，1974）：α-羥基檸檬酸三鈉2．43克；碳酸氫鈉0．21克；氯化鉀0．04克；磺胺0．30克；雙蒸水100毫升（ph8．4）。
（2）甘氨酸生理液：甘氨酸0．75克；氯化鈉0．58克；雙蒸水100毫升（ph8．6）。
（3）氯化鈉生理液：氯化鈉3．5克；抗生素（如硫酸鏈霉素）少許（約1．0克）；雙蒸水400毫升（ph7．0～7．3）。
二、授精的環(huán)境
蜜蜂人工授精工作，無(wú)菌操作至關(guān)重要。由于操作消毒不徹底，蜂王可能染病死亡或傳病給子代。在授精過(guò)程中，直接病原就是蜂王和雄蜂體表以及人的皮膚。因此，在進(jìn)行人工授精過(guò)程中嚴(yán)格要求無(wú)菌操作是十分必要的，要求：窗明幾凈，地面清潔無(wú)浮塵，采精前2小時(shí)，用5％來(lái)蘇兒噴灑地面；臺(tái)面用75％酒精擦拭；空間用紫外線燈照射；小型器皿、刀、剪、鉤、針用煮沸鍋消毒至少30分鐘；塑料針頭和有機(jī)制品，用配有抗生素的消毒液、雙蒸水、生理液依次沖洗，所有已消毒的器物，均須妥善放置，謹(jǐn)防二次污染。所有用作滅菌的酒精和消毒劑，不得與雄蜂、雄蜂精液和蜂王接觸。
蜜蜂人工授精操作環(huán)境，除了要求無(wú)菌操作外，適宜的溫度也是十分重要的。溫度太低，蜂王容易凍僵，雄蜂活動(dòng)遲緩而不利排精，給采精操作帶來(lái)困難。室溫在20℃～30℃，授精效果較為理想。
三、人工授精
1、精液采集
雄蜂選擇。 雄蜂出房12天后，即達(dá)性成熟，便可捕捉采精。性成熟雄蜂的捕捉方法，有利用顏色標(biāo)記雄蜂日齡法、巢內(nèi)直接選擇性成熟雄蜂法、巢門捕捉婚飛雄蜂法和捕捉幽閉飼養(yǎng)雄蜂法，但是無(wú)論哪種方法捕捉雄蜂，均要求所捕雄蜂種純、個(gè)大、健壯、活躍和性成熟。
強(qiáng)迫排精�！∮米笫帜粗负褪持笍母姑孀阶⌒�、腹部?jī)蓚?cè)，用右手拇指按壓雄蜂的腹部背板1節(jié)～3節(jié)處，然后三指配合，同時(shí)向腹部尾端施加壓力，強(qiáng)迫“陰莖”外翻并射精。注意用力適度，以保精液在“陰莖”頂端形成近球狀，以利采集且不易被污染。
精液采集�！⌒鄯渚旱牟杉袃煞N方法：一是體視顯微鏡下，直接用進(jìn)樣器逐只雄蜂采集精液；二是采用漂洗技術(shù)采集精液。目前，應(yīng)用較普遍的方法是第一種，該法應(yīng)用簡(jiǎn)便快捷，隨采隨用，精子活力強(qiáng)，污染機(jī)會(huì)少，授精效果理想。其方法為：先將針頭吸入少許生理液和氣泡，然后，右手操縱進(jìn)樣器，使針頭與精液接觸，后稍微拉開(kāi)點(diǎn)距離，但二者并不斷開(kāi)，這樣就能借助于精液本身的粘滯性，把覆蓋在白色粘液上的土黃色精液較完全地抽吸進(jìn)針頭，然后繼續(xù)采集其它雄蜂的精液，但要注意：每2只雄蜂的精液間，不應(yīng)出現(xiàn)氣泡隔離；待針頭內(nèi)貯滿所需精液量后，用生理液封閉針頭，以防精液干涸或污染；將針頭外側(cè)粘附雜物用浸過(guò)抗生素的棉簽擦去后，便可提升針頭的位置，準(zhǔn)備給蜂王授精。
2、精液注射
處女王的選擇�！√幣醯馁|(zhì)量關(guān)系到人工授精的效果和新建蜂群的質(zhì)量，要求人工授精處女王個(gè)體大、腹部碩長(zhǎng)、無(wú)殘損、行動(dòng)穩(wěn)健、性成熟。
處女王麻醉。 處女王裝入麻醉室后，安裝到授精儀上，開(kāi)啟二氧化碳鋼瓶閥門，調(diào)節(jié)至每分鐘從洗氣瓶冒出300個(gè)氣泡為宜，麻醉30秒左右，蜂王進(jìn)入昏迷狀態(tài)，直到授精完畢，方可解除麻醉。
3、授精
打開(kāi)螫針腔�！》渫趼樽砗�，調(diào)整顯微鏡，在鏡下移動(dòng)背腹鉤操縱桿，使背腹鉤在探針配合下，分別鉤住背腹板頂端的中央位置，并向外側(cè)拉動(dòng)背腹板，使其間距為3毫米～4毫米，然后再移動(dòng)背鉤，使其“膨大”部分嵌入到螫針腔基部的三角縫內(nèi)，再拉動(dòng)背腹鉤，把背腹板間距拉至5毫米～6毫米。
進(jìn)針注射。 螫針腔打開(kāi)后，調(diào)整蜂王和針頭的角度，排除針頭尖中的生理液和氣泡后，使針尖接近陰道口，用探針壓住瓣突，將針尖徐徐推入陰道直至中部輸卵管，取出探針，將精液慢慢注入。一次性授精通常注入8微升精液；兩次性授精，每次各注4微升～5微升精液，其間隔24小時(shí)～48小時(shí)。授精完畢，10秒～15秒后退出針頭，取出蜂王，點(diǎn)上標(biāo)記，待其復(fù)蘇后，送回原核心群或框式王籠暫時(shí)貯存。
四、人工授精后的管理
蜂王人工授精后，需要細(xì)心管理，注意以下幾個(gè)方面：首先，蜂王授精后要及時(shí)放回原核心群（或大群），使其能得到工蜂飼喂，不致受餓而影響發(fā)育；其次，要保證授精王所在蜂群的蜂數(shù)，以便蜜蜂能自行調(diào)節(jié)巢溫；因?yàn)椋瑴囟仁侵萍s精子轉(zhuǎn)移的重要因素；另外，還要預(yù)防蜂王出巢進(jìn)行自然交尾，方法是將蜂王剪翅或幽閉巢門，防止蜂王外出，也可利用大型框式王籠封閉觀察其產(chǎn)卵情況。
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