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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時間:2018-03-14 作者:佚名 來源:網(wǎng)絡(luò)整理
本病根據(jù)流行病學(xué)特點、癥狀和病理變化可作出初步診斷,血常規(guī)檢查有助診斷,但最終的確診需要作病原學(xué)和血清學(xué)等方面的工作。
(一)病毒分離:病毒的分離培養(yǎng)是CIAV鑒定中最常用的方法。肝臟含有高滴度的病毒,是分離CIAV病毒的最好材料,可將肝臟制成勻漿,離心取上清液,加熱70℃5min或用氯仿處理去除或滅活可能的污染物,用于雛雞、雞胚或細胞培養(yǎng)接種。
1.接種雛雞:1日齡SPF雛雞是初次分離CIAV最特異、最可靠的動物實驗方法。用肝臟病料1∶10稀釋肌肉或腹腔接種1日齡SPF雛雞,每只0.1ml,觀察典型癥狀和病理變化。
2.接種雞胚:用肝臟病料卵黃囊接種4~5日齡雞胚,無雞胚病變,孵出小雞發(fā)生貧血和死亡。
3.接種細胞培養(yǎng)物:MDCC-MSB1常被作為體外分離鑒定CIAV的主要細胞。病雞的肝、脾、胸腺、骨髓等均可作為分離病毒用的病料。初次接種病料的細胞看不到細胞病變,一般須經(jīng)過5~6次盲傳后,可見感染細胞腫脹、邊緣破裂,死亡細胞逐漸增多,最后細胞大部分死亡,表明有CIAV感染。
(二)血清學(xué)診斷:目前已建立的CIAV血清學(xué)診斷技術(shù)有VN、IFN、ELISA,可用于檢測感染雞血清中的抗體。其中,ELISA是檢測CIAV抗體的一種良好的血清學(xué)方法,其敏感性高,操作簡便、快速,所需血樣少,可以同時檢測大量樣品,利于大規(guī)模普查。近年來以重組VP1、VP2、VP3做為包被抗原建立的ELISA技術(shù)取得了重大進展,可用以檢測CIAV抗體。與傳統(tǒng)的全病毒抗原相比,重組抗原更具優(yōu)勢?捎妹庖邿晒饪贵w試驗和免疫過氧化物酶試驗檢測發(fā)病雞組織或細胞培養(yǎng)物中的病毒抗體。
(三)分子生物學(xué)診斷:目前有許多分子生物學(xué)方法,如核酸探針技術(shù)和PCR等技術(shù),用于組織或細胞中病毒的檢測,其敏感性和特異性都比較高。
(四)鑒別診斷:該病應(yīng)該與成紅細胞引起的貧血、MDV和IBDV感染、腺病毒感染、球蟲病以及高劑量的磺胺類藥物和真菌毒素中毒進行區(qū)別。
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