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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間:2018-03-14 作者:佚名 來源:網(wǎng)絡(luò)整理
俗稱借腹懷胎,是提高良種母牛繁殖潛力、加快品種更新的一項(xiàng)實(shí)用高新技術(shù)。主要包括供體、受體的準(zhǔn)備,供體的超數(shù)排卵與配種,胚胎的收集、檢查、冷凍保存和移植等幾個(gè)基本環(huán)節(jié)。
1.供體、受體的準(zhǔn)備供體、受體均要求為青壯年牛,膘情中等偏上,繁殖機(jī)能正常,一般應(yīng)有2個(gè)以上正常的繁殖周期。此外,供體應(yīng)是良種,鮮胚移植時(shí),供、受體發(fā)情要同步,數(shù)量比例要適當(dāng),一般為1:5-8為宜。2.供體的超數(shù)排卵與配種牛每次發(fā)情后一般只排一個(gè)卵,利用外源性促性腺激素處理能使卵巢一次排出多個(gè)卵子,即為超數(shù)排卵技術(shù)。通常在母牛發(fā)情周期的第9-14天肌肉注射FSH進(jìn)行超排處理,連續(xù)注射4天,每日早晚各一次,總量為40-50毫克,劑量均等或遞減,第三天的第五次注射時(shí),同時(shí)注射PGF2a。,一般在注射48小時(shí)后,母牛即發(fā)情排卵。超排處理以后的發(fā)情供體母牛,用活率高、密度大的優(yōu)良公牛精液配種,適當(dāng)增加人工授精的次數(shù),兩次輸精間隔8-10小時(shí)。
3.胚胎的收集牛胚胎移植通常用非手術(shù)法,利用雙通式導(dǎo)管沖卵器多次向子宮角注入沖卵液,反復(fù)沖洗回收桑椹至囊胚期胚胎。
4.胚胎的檢查在實(shí)體顯微鏡下從回收的沖卵液中檢出胚胎,主要依據(jù)形態(tài)學(xué)進(jìn)行分類,選發(fā)育階段正常,外形勻稱,卵裂球比較緊密的A、B級(jí)胚胎可供移植或冷凍保存。目前,每頭供體牛一般可獲得8枚左右可用胚。
5.胚胎的冷凍保存胚胎冷凍保存可以克服鮮胚移植受時(shí)間、地點(diǎn)等因素的限制,為胚胎移植技術(shù)推廣應(yīng)用和充分發(fā)揮其優(yōu)勢(shì)提供了保證。冷凍方法有緩慢降溫法、快速冷凍法和一步冷凍法等3種。快速冷凍法因胚胎解凍后存活率及移植成功率較高,為目前生產(chǎn)中最常用的方法。簡要介紹如下:室溫條件下,先將胚胎加入1.4摩爾甘油冷凍液中脫水平衡20分鐘,再裝入0.25毫升細(xì)管,然后將裝有胚胎的細(xì)管放入程控冷凍儀中,0℃平衡10分鐘,以1℃/分的速度降至-6--7℃,人工植冰并平衡10分鐘,然后以0.3℃/分的速度降溫至-35--38℃,投入液氮保存。解凍時(shí)從液氮中取出裝胚胎的細(xì)管,立即投入37℃水浴中,并輕輕擺動(dòng),1分鐘后取出即完成解凍過程。然后用0.2-0.5摩爾蔗糖PBS液分兩步或一步法脫除冷凍保護(hù)劑使胚胎復(fù)水,最后移人PBS培養(yǎng)液中準(zhǔn)備移植。
6.胚胎的移植將胚胎吸入0.25毫升細(xì)管中,兩端有小氣泡固定保護(hù)。采用直腸把握子宮頸法,利用卡蘇槍非手術(shù)法將胚胎移植入黃體側(cè)子宮角大彎的前端。胚胎移植給受體后,要加強(qiáng)護(hù)理,移植后不要頻繁地進(jìn)行直腸檢查,以防流產(chǎn)。注意觀察受體牛的返情情況,對(duì)于未發(fā)情的受體牛,應(yīng)在移植2個(gè)月后通過直腸檢查來判斷是否懷孕。
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