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豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分離與鑒定

84農(nóng)業(yè)網(wǎng)   時(shí)間:2018-03-14    作者:佚名    來(lái)源:網(wǎng)絡(luò)整理

該研究首次發(fā)現(xiàn)豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)已在國(guó)內(nèi)流行、暴發(fā)并造成了重大經(jīng)濟(jì)損失,同時(shí)進(jìn)行了PRRS病毒分離鑒定研,從而首次研證國(guó)內(nèi)存在該病。

該項(xiàng)成果在國(guó)內(nèi)首次建立并采用了Marc-145細(xì)胞和豬肺泡巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù),率先在國(guó)內(nèi)暴發(fā)PRRS豬群分離到4株病毒。經(jīng)采用PRRSSDOW-17單克隆抗體間接免疫熒光染證明4個(gè)分離毒株為PRRS病毒,分別用美洲型和歐洲型PRRS病毒多克隆血清間接免疫熒光染色進(jìn)一步證明4個(gè)分離株均屬于美洲型PRRS病毒。間接免疫熒關(guān)染色試驗(yàn)證明分離毒株與豬氳病毒、偽狂犬病毒、細(xì)小病毒等主要豬病原無(wú)交叉反應(yīng)。采用電鏡技術(shù)對(duì)分離毒株細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行負(fù)染和超薄切片觀察,結(jié)果表明,該分離毒株為直徑40~80mm球形,有囊膜病毒(與國(guó)外報(bào)道-致)。用該分離毒株進(jìn)行人工感染試驗(yàn),出現(xiàn)有PRRS,特證性的臨床和病理變化,復(fù)制出本病并在感染豬體內(nèi)梭出PRRS抗體和回收到PRRS病毒,符合Koch’s三原則。同時(shí)研究明確了該病毒理化特性,均與國(guó)外報(bào)道一致。采用RTPCR方法從分子生物學(xué)角度證明分離毒株為美洲型PRRS病毒。

該項(xiàng)成果可應(yīng)用于我國(guó)PRRS的診斷方法研究、PRRS病毒的病毒學(xué)和免疫學(xué)等基礎(chǔ)性研究。本研究分離毒株已用于制備病毒的病毒學(xué)和免疫學(xué)等基礎(chǔ)性研究。本研究分離毒株已用于制備PRRS診斷液,并通過(guò)舉辦“農(nóng)業(yè)部豬繁殖與呼吸診斷技術(shù)師資培訓(xùn)班”在全國(guó)推廣使用,同時(shí)該分離毒株已用于研制PRRS疫苗并獲得初步進(jìn)展。該項(xiàng)目為我國(guó)進(jìn)一步開(kāi)展PRRS的防制研究奠定了理論和物質(zhì)基礎(chǔ)。

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