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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時間:2018-03-15 作者:佚名 來源:網(wǎng)絡(luò)整理
3.母種分離方法有孢子彈射、組織分離和基質(zhì)菌絲分離3種方法。這里主要介紹組織分離方法。組織分離方法:即切取各菇上小塊組織移接于斜面培養(yǎng)基上,培養(yǎng)成母種。食用菌的子實體實際上就是雙核菌絲的紐結(jié)物,它具有很強的再生能力。因此,只要切取一小塊組織,把它接種到適宜的培養(yǎng)基上,適溫培養(yǎng),就能得到純菌絲體。組織分離是把選好的種菇帶入無菌室,在超凈工作臺上,用75%的酒精棉揩拭菌蓋與菌柄,再用經(jīng)火焰滅菌的解剖刀在菌柄的中部切開。使菇體形成對開。在菌蓋和菌柄交界處或菌褶處,用接種刀切取一小塊菇體,然后縱切成5毫米×10毫米的小薄片,用接種針挑取一塊薄片,接入斜面培養(yǎng)基的中央,每支試管接種一小塊薄片,待其萌發(fā)菌絲,即可得到母種。
4.適溫培養(yǎng)將上述試管放入已消毒的培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng),溫度控制在25℃左右,使分離獲得的孢子或菌絲在適溫下發(fā)育。組織分離接種后二三天,菌絲即萌發(fā),并在培養(yǎng)基上蔓延生長;菇體分離接種后,一般情況下組織塊先轉(zhuǎn)為黑褐色,大約7天后組織培養(yǎng)塊上長出白色絨毛狀菌絲。
5.母種的提純在菌絲萌發(fā)后,要認真觀察,挑選色澤純、健壯、長勢正常和無間斷的菌線,在無菌室超凈工作臺上連同培養(yǎng)基鉤取菌絲,接人另備的試管培養(yǎng)基上。在23℃~25℃的恒溫條件下,培養(yǎng)7天~10天,待菌絲長滿試管后,再進行觀察,從中擇優(yōu)取用,即為“母代”母種。
6.母種的轉(zhuǎn)管培養(yǎng)將一支長滿菌絲的試管在無菌操作下,分別轉(zhuǎn)接到多只試管中培養(yǎng)。一般每支母種可擴接30支~50支,生產(chǎn)上供應(yīng)的多為子代母種。它可以再次轉(zhuǎn)管擴接。一般每支又可擴接成20支~25支子代母種,但轉(zhuǎn)管次數(shù)不得超過4次。因轉(zhuǎn)管代數(shù)過多易使菌種生活力降低。
7.出菇試驗把母種接種于瓶裝或袋裝的木屑培養(yǎng)基上,根據(jù)各種菇的種性對溫度的要求,進行適溫培養(yǎng),直至出菇才證實可用于生產(chǎn)。
二、原種繁殖培養(yǎng)
將母種接在瓶裝或袋裝的木屑培養(yǎng)基上,通過培養(yǎng),即成原種。
三、栽培種擴大培育
將原種再次擴接在同樣的木屑培養(yǎng)基上,在適溫條件下培養(yǎng)30天~35天即為栽培種(又叫生產(chǎn)種),可用于生產(chǎn)栽培。
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