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84農業(yè)網(wǎng) 時間：2018-03-14 作者：佚名 來源：網(wǎng)絡整理
鋸緣青蟹簡稱青蟹，是我國浙江、福建和廣東等東南沿海省份的主要養(yǎng)殖品種，因其肉質鮮美，營養(yǎng)豐富，經濟價值高而得到持續(xù)快速發(fā)展，產值達幾十億元。"黃水病"（亦稱白水病、白漿�。┦悄壳扒嘈佛B(yǎng)殖發(fā)展中的主要疾病之一，其發(fā)病范圍廣、死亡率高，給養(yǎng)殖青蟹造成重大經濟損失，嚴重制約了青蟹養(yǎng)殖的健康發(fā)展。該病主要表現(xiàn)為病蟹蟹體消瘦，肌肉白濁，打開蟹蓋可見到不同程度的土黃色或濁白色牛奶狀液體等癥狀。
自該病發(fā)生以來，不少研究者對其發(fā)病原因進行研究，但結果各不相同，其病原至今仍有較大的爭議，紀榮興等1998報道非液化摩拉氏菌是"黃水病"的病原，毛之娟等2001曾報道辛辛那提弧菌等是"黃水病"的病原，宋振榮等1998認為病毒是肌肉壞死"黃水病"的病原，而韓新全等則認為環(huán)境因素是誘發(fā)"黃水病"的根本原因。筆者通過大量取樣發(fā)現(xiàn)，所有"黃水病"病蟹的血淋巴和組織中均可發(fā)現(xiàn)大量的寄生原蟲，經過病原、組織病理、電鏡觀察以及分子生物學方法研究，確定血卵渦鞭蟲Hematodinium.sp是引起養(yǎng)殖青蟹"黃水病"的重要病原�，F(xiàn)將調查的初步情況報告如下，希望能為該病的診斷和防治提供科學依據(jù)。
1、流行情況
該病主要發(fā)生在南方沿海養(yǎng)殖鋸緣青蟹當中，在浙江的象山港、三門灣和樂清灣一帶，包括三門、玉環(huán)、樂清、寧海、象山等地每年均有不同程度的發(fā)生，并往往呈暴發(fā)性流行趨勢，流行率通常在30%～50%左右，平均死亡率達20%，病情重的圍塘，死亡率可達60%～70%以上，個別塘甚至出現(xiàn)絕產，給養(yǎng)殖生產帶來極大損失。該病通常病情發(fā)展緩慢，從發(fā)病到死亡往往持續(xù)較長時間，但具有傳染性，發(fā)病率和死亡率高。初步研究發(fā)現(xiàn)，其流行與季節(jié)、溫度、鹽度等環(huán)境因子、個體大小及性別等可能存在一定的關系。主要發(fā)生在每年的6月份～10月份的夏秋季節(jié)，其中以7～9月高水溫期為發(fā)病流行高峰，尤其是在溫鹽度環(huán)境變化較大的梅雨季節(jié)和臺風季節(jié)，會在短時間內出現(xiàn)死亡高峰。另外，小個體較大個體成活率高，雄性個體較雌性個體死亡嚴重。鹽度較低的地區(qū)如杭州灣沿岸的慈溪、余姚等地尚未見發(fā)生。
2、發(fā)病癥狀
患"黃水病"病蟹通常攝食下降或停止攝食，行動遲緩，嚴重者往往爬到塘堤或涂面上死亡。病蟹蟹體消瘦，體色暗淡，關節(jié)膜處呈黃色或濁白色，部分附肢關節(jié)的外殼呈粉紅色，步足關節(jié)失去彈性、易脫落。剖開步足或大螯，可見肌肉以感染輕重而出現(xiàn)不同程度的白濁液化;打開蟹蓋，可見肝胰腺模糊呈紅棕色或乳白色，腸胃空，鰓呈土黃色或黑褐色，個別病蟹的鰓并發(fā)黑鰓病;甲殼腔內的血液由正常時的藍青色具較強凝聚性轉變?yōu)槌实S色或濁白色牛奶狀不能凝固的變性液體。
組織病理觀察發(fā)現(xiàn)所有"黃水病"病蟹的血淋巴急劇下降，代之以大量的寄生原蟲。病蟹的肝胰臟、心臟、足部肌肉以及鰓等部位亦均充滿上述寄生原蟲，而作為對照組健康青蟹的各器官組織中則未發(fā)現(xiàn)有寄生蟲，表明該寄生蟲與青蟹的"黃水病"有密切的關系。病蟹在發(fā)病中后期，由于寄生蟲的大量寄生，導致血淋巴數(shù)量急劇下降，并表現(xiàn)出濁白色和不能凝聚等癥狀;同時其各重要組織器官均發(fā)生嚴重病變，生理功能喪失，進一步導致病蟹死亡。
3、病原形態(tài)與分子生物學特性
用1ml注射器先吸取10%海水甲醛固定液0.1ml，再從青蟹圍心腔內抽取等量血淋巴液混勻，將固定的血淋巴滴少許于玻片上，蓋上蓋玻片，于顯微鏡下觀察可見血淋巴急劇下降，代之以大量的寄生原蟲。從不同"黃水病"病蟹的乳白色液體中可以發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育階段的蟲體，多數(shù)呈卵圓形，有單核、雙核或多核期，大小約5～10多微米不等，也可見帶2條鞭毛的孢子階段。分離到的不同階段蟲體與Stentiford所描述的其他甲殼類中寄生的血卵渦鞭蟲的營養(yǎng)體、多核原生質體以及帶鞭毛的孢子體形態(tài)、結構特征極為相似。
取病蟹血淋巴，采用Hudson等1994的血卵渦鞭蟲Hematodiniurn.sp特異引物進行PCR擴增，擴增產物進行1.5%的瓊脂糖凝膠電泳，結果發(fā)現(xiàn)"黃水病"病蟹的血淋巴樣品均能擴增出680bp左右的條帶，而對照的健康蟹血淋巴樣品則沒出現(xiàn)條帶。根據(jù)擴增產物的測序結果，可以確定該寄生蟲為一種血卵渦鞭蟲Hemarodiniurn.sp，初步認定其是引起養(yǎng)殖鋸緣青蟹"黃水病"的重要病原。
4、感染途徑
根據(jù)Shield（1994）等研究，血卵渦鞭蟲在甲殼類體內寄生階段的生活史大致包括3個階段，即營養(yǎng)體階段、多核原生質階段及無性繁殖階段（孢子生殖），通過孢子生殖會產生孢子母細胞，進一步發(fā)育形成兩種大小形態(tài)相異的帶鞭毛具有運動性的腰鞭孢子階段（大腰鞭孢子和腰鞭孢子）。成熟的腰鞭孢子通過口部的甲殼開裂處釋放到水體，并能在海水中存活幾天時間。根據(jù)1998年Appleton等的離體培養(yǎng)結果，其可能進一步發(fā)育成為營養(yǎng)體。
有關血卵渦鞭蟲確切的感染和傳播途徑。Shields等認為在大多數(shù)海產甲殼類的寄生腰鞭蟲中，腰鞭孢子很可能是感染期，但目前尚不清楚其是否可能產生休眠孢子或存在其他中間宿主。研究表明人工注射感染病蟹的血淋巴（包括營養(yǎng)體和腰鞭孢子）能成功感染健康蟹類。但Cachon（1987）利用自由游動的腰鞭孢子浸浴健康梭子蟹卻未能感染成功。類似于許多其他甲殼類原生動物，同類相食可能是某些宿主間傳播的有效方式。Sheppard等（2003）通過投喂病蟹的方法，在Calllnectessapidus上獲得投喂感染的成功。另外，深海枝角類等餌料生物也有可能是寄生蟲的中間宿主，因為在這些餌料生物中也檢測到了類血卵渦鞭蟲的存在。Meyers等（1996）發(fā)現(xiàn)，血卵渦鞭蟲可能通過性傳播，其存在于一些雄性個體輸精管的精液里，但需要進一步研究證實。
對發(fā)病情況的調查結果顯示，該病與養(yǎng)殖環(huán)境存在較大關系，圍塘老化、養(yǎng)殖密度高、水交換條件差的池塘容易發(fā)病，尤其是在臺風、暴雨等環(huán)境突變時導致養(yǎng)殖水體鹽度、pH值、水溫異常變化，青蟹往往由于強烈的應激反應，免疫抗病力下降，導致"黃水病"及并發(fā)病的流行。
5防治建議
目前尚無有效的治療藥物。必須堅持"以防為主、綜合治理"的原則予以預防，建議現(xiàn)階段應從病原控制、苗種質量、環(huán)境優(yōu)化以及養(yǎng)殖青蟹抗病力提高等方面著手，采取積極有效的措施，控制疾病的發(fā)生和蔓延：
1、做好放養(yǎng)前的清塘、消毒工作：池塘老化、環(huán)境污染嚴重，是導致各類病害多發(fā)的主要原因，必須做好放養(yǎng)前的清淤消毒工作，以控制和消滅病原，切斷傳播途徑。
2、選擇健康苗種：放養(yǎng)健壯和不帶病原的苗種是養(yǎng)殖生產成功的基礎。必須選擇體質健壯、無傷病、規(guī)格較大的種苗，并經檢疫和消毒后才能放養(yǎng)。
3、加強養(yǎng)殖管理、優(yōu)化養(yǎng)殖環(huán)境：控制放養(yǎng)密度、合理投喂餌料、科學管理水質，通過采取物理、化學、生物和生態(tài)方法進行養(yǎng)殖環(huán)境的調控優(yōu)化，以控制疾病的發(fā)生。
4、減少應激、提高機體抗病力：應激原過于強烈，或持續(xù)的時間較長，往往使機體的免疫機能和抵抗力下降從而易受病原體的感染。應盡量減少應激因子，包括環(huán)境突變、污染以及人為的各種操作等原因可能對養(yǎng)殖青蟹造成的應激反應;投喂優(yōu)質飼料、添加免疫激活劑（如多維、免疫多糖、VitC，VitE等），提高機體的免疫力和抗病力。
5、開展配合飼料研究與推廣應用：檢測發(fā)現(xiàn)，作為青蟹主要飼料來源的小蝦蟹亦是黃水病病原的攜帶者，鮮活飼料極有可能是疾病的一個感染途徑，同時鮮活餌料的大量投喂也是影響?zhàn)B殖底質、導致水質環(huán)境惡化的主要因素，應積極開展人工配合飼料的研制與推廣應用。
6、加強監(jiān)測，防止病原擴散：黃水病是一種危害較大的流行性疾病，應對該病的發(fā)生情況進行監(jiān)測，一旦發(fā)現(xiàn)疾病，應及時采取措施控制病原的傳播與擴散，病蟹及尸體應作消毒深埋或銷毀處理，以免進一步傳染。同時必須注意藥物的濫用。
7、加強疾病傳播途徑及養(yǎng)殖技術研究：一方面進一步摸清疾病的感染途徑，從源頭上控制病原的發(fā)生和蔓延;另一方面，要開展健康養(yǎng)殖技術研究，探索適合青蟹產業(yè)化發(fā)展的高效健康養(yǎng)殖模式，從根本上杜絕該類疾病的發(fā)生。
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