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柑桔黃龍病病原培養(yǎng)及免疫診斷

84農業(yè)網　　 時間：2018-03-14 　　 作者：佚名 　　 來源：網絡整理

該技術針對柑桔的毀滅性病害黃龍病，對黃龍病類細菌進行分離培養(yǎng)，研制半合成培養(yǎng)基的配方，制定了從病葉葉脈分離BLO的培養(yǎng)方法，建立了BLO分離培養(yǎng)技術。用人工培養(yǎng)的BLO活菌或BLO蛋白免疫小鼠(或家兔)制得單克隆抗體及免疫血清，并創(chuàng)立了下列4種免疫診斷方法：①酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)，即用辣根過氧化物酶標記單克隆抗體，以聯(lián)苯二胺為顯色劑，將柑桔葉子的勻漿作材料，3天內可得正確結果；②酶標免疫定位法，即用辣根過氧化物酶標記單克隆抗體，以聯(lián)苯二胺為顯色劑，將柑桔葉子的葉脈徒手切片作材料，此法為定性分析，l.5天內可得結果；②熒光抗體檢驗法，即用培養(yǎng)病原的免疫血清或單克隆抗體作第一抗體，以異硫氰熒光素(FITC)標記的IgG(羊抗鼠或羊抗兔)作第二抗體，將柑桔葉子的葉脈作徒手切片為材料，此法屬定性分析方法；④膠體金一銀標記免疫檢測法，即用膠體金標記免疫血清或單克隆抗體，以硝酸銀作染色劑，將柑桔葉子的葉脈徒手切片作材料，也屬定性分析方法，在6小時內完成檢測。上述技術實現(xiàn)了柑桔發(fā)病前的預知診斷，防止了病害流行，提高了果樹的生產能力。

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